Gタンパク質共役型受容体(GPCR)

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Gタンパク質共役型受容体(GPCR)の研究に

 

参考文献

こちらから

 

cAMPキット

Gs/i 経路の検討には経路及び測定領域に合わせ、3種類のcAMP 測定キット(Gsダイナミック、Gsハイレンジ、Gi)が用意されています。

また、GPCR 発現細胞膜画分を用いた高濃度ATP 存在下(〜1mM)のcAMP アッセイが、c
AMP Gsハイレンジキットによって可能です。

製 品 名 S/B 比 EC20(nM) EC50(nM) EC80(nM)
cAMP Gsダイナミック >14 0.91 4.07 18.1
cAMP Gsハイレンジ >28 4.27 22.8 121
cAMP Gi >31 0.8 (IC10) 3.0 (IC50) 12 (IC90)

cAMPキットプロトコル

HTRF® アッセイは洗浄操作が不要なイムノアッセイなので、プロトコルが非常に簡便です。また、d2標識cAMP及びクリプテート標識cAMP抗体溶液にTriton-Xを含むため、細胞溶解とシグナル検出がワンステップで可能です。

製品名 包装(テスト数) カタログNo. 保存温度
cAMP Gs Dynamic   1,000 テスト 62AM4PEB 2~8℃
20,000 テスト 62AM4PEC 2~8℃
 100,000 テスト 62AM4PEJ 2~8℃
cAMP Gs HiRange   1,000 テスト 62AM6PEB 2~8℃
20,000 テスト 62AM6PEC 2~8℃
 100,000 テスト 62AM6PEJ 2~8℃
cAMP Gi    1,000 テスト 62AM9PEB 2~8℃
20,000 テスト 62AM9PEC 2~8℃
 100,000 テスト 62AM9PEJ 2~8℃
cAMP Gs Dynamic & Giキット スタンダード 1バイアル 62AM4CDA 2~8℃
cAMP Gs HiRangeキット スタンダード 1バイアル 62AM6CDA 2~8℃

※cAMP Giキットに関するポスターはこちらからご覧いただけます。

※cAMPガイドはこちらからダウンロードいただけます。

 

 

 

IP-Oneキット


イノシト-ル1,4,5-三リン酸(IP3)をセカンドメッセンジャーとするGq経路の検討には、IP3 に代わり、その分解物であるIP1の測定を提案しています。
IP3 は極めて短寿命であるため、IP3 → IP2 → IP1→イノシトールの脱リン酸化経路を塩化リチウム(LiCl)の添加によりIP1で停止し蓄積させ、測定します。バイアスリガンドやslow-bindingリガンドの探索に有用です。

IP-Oneキットプロトコル

IP-Oneキットは細胞数の検討とキット付属のstimulation bufferに溶解させた被験物質での刺激時間の最適化が重要です。

製品名 包装(テスト数) カタログNo. 保存温度
IP-One Gq    1,000 テスト 62IPAPEB 2~8℃
20,000 テスト 62IPAPEC 2~8℃
 100,000 テスト 62IPAPEJ 2~8℃
IP-One ELISA   96 テスト x 1 72IP1PEA 2~8℃
 96 テスト x 5 72IP1PED 2~8℃

 テルビウムクリプテートを使用しています。プレートリーダーの機種によっては設定条件の変更をお勧めします。

※IP-One ELISAキットにはマイクロプレートが添付されています。

※IP-Oneガイドはこちらからダウンロードいただけます。

cAMP・IP-Oneキット関連試薬

製品名 包装 カタログNo. 保存温度
Forskolin – Adenylyl cyclase activator  40 μl 62AMYADA 2~8℃
800 µl 62AMYADC 2~8℃
IBMX – Phosphodiesterase inhibitor  40 μl 62AMXADA 2~8℃
500 µl 62AMXADC 2~8℃
IP-Oneキット スタンダード    1バイアル 62IP1CDA 2~8℃
IP-One stimul. Buffer 5X  8 ml 62IP1FDC 2~8℃
100 ml 62IP1FDG 2~8℃
Lysis & Detection Buffer 1 – 13 ml  13 ml 62CL1FDD 2~8℃
Lysis & Detection Buffer 2 – 200 ml 200 ml 62CL2FDF 2~8℃
Stimulation Buffer 1 (5X) – 8 ml  8 ml 64SB1FDC 2~8℃
Stimulation Buffer 1 (5X) – 100 ml 100 ml 64SB1FDD 2~8℃

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