蛍光バインディングアッセイ

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Gタンパク質共役型受容体(GPCR) 研究の革新的ツールTag-lite ®

Tag-lite® はHTRF® とSNAP-tag テクノロジーの融合により開発された細胞表面受容体研究の革新的ツールです。受容体とリガンドとのバインディングアッセイを始め、受容体の高次構造変化(Oligomerization)研究等に幅広く応用可能な簡便性の高いNon-RIのアッセイシステムです。

■ 蛍光標識リガンド バインディングアッセイ
■ 高次構造変化(ダイマー機能解析)

SNAP – Tag とその特長

SNAP-tag及びCLIP-tagはCovalys社により開発された機能性タンパクタグです。融合発現させることで受容体に蛍光試薬を特異的に標識することができます。SNAP-tagは改変された06-alkylguanine DNA alkyltransferase(AGT)で、Benzylguanine(BG)誘導体蛍光試薬であるTag-lite 基質を自殺基質として反応し、BGを遊離すると共にその活性中心へ蛍光試薬を共有結合により導入します。
また、CLIP-tagはBenzylcytosine(BC)誘導体と特異的に反応し、SNAP-tagとは異なる基質特異性を示します。
よって2種類の受容体からなるheterodimerizationやoligomerization研究において、各々の受容体をSNAP-tag及びCLIP-tagと融合発現させることで、それぞれ異なるTag-lite 基質で特異的に標識することが可能です。SNAP-tag及びCLIP-tag融合タンパク発現用プラスミドとして4種類をご用意しています。


バインディング アッセイ

GPCRとSNAP-tagを一過性に発現させたテルビウム クリプテート標識凍結細胞と蛍光標識リガンドを組み合わせることで、簡単にnon-RIバインディング アッセイが可能です。

 

更に詳しい技術情報はこちらから → http://www.cisbio.com/japan/drug-discovery/tag-lite-technology

テルビウムクリプテート標識凍結細胞

レセプター 包装 カタログNo. 保存温度
Adenosine A2A   200 テスト C1TT1A2A -80℃ or below
Adrenoceptor Beta1    200 テスト C1TT1BETA1 -80℃ or below
Adrenoceptor Beta2    200 テスト C1TT1BETA2 -80℃ or below
Anaphylatoxin C5L2    200 テスト C1TT1C5L2 -80℃ or below
Angiotensin AT2    200 テスト C1TT1AT2 -80℃ or below
Bombesin BB1      200 テスト C1TT1BB1 -80℃ or below
Bombesin BB2      200 テスト C1TT1BB2 -80℃ or below
Bradykinin B1       200 テスト C1TT1B1 -80℃ or below
Bradykinin B2       200 テスト C1TT1B2 -80℃ or below
Cholecystokinin CCK1    200 テスト C1TT1CCK1 -80℃ or below
Cholecystokinin CCK2    200 テスト C1TT1CCK2 -80℃ or below
Chemokine CCR5          200 テスト C1TT1CCR5 -80℃ or below
Chemokine CXCR4        200 テスト C1TT1CXCR4 -80℃ or below
Class A Orphans GPR1   200 テスト C1TT1GPR1 -80℃ or below
Dopamine D1      200 テスト C1TT1D1 -80℃ or below
Dopamine D2      200 テスト C1TT1D2 -80℃ or below
Dopamine D3a    200 テスト C1TT1D3A -80℃ or below
Endothelin ETA    200 テスト C1TT1ETA -80℃ or below
Endothelin ETB    200 テスト C1TT1ETB -80℃ or below
Ghrelin GHSR1A   200 テスト C1TT1GHSR1A -80℃ or below
Glucagon GIPR    200 テスト C1TT1GIPR -80℃ or below
Glucagon GLP1    200 テスト C1TT1GLP1 -80℃ or below
Histamine H1      200 テスト C1TT1H1 -80℃ or below
Histamine H3      200 テスト C1TT1H3 -80℃ or below
Muscarinic M1     200 テスト C1TT1M1 -80℃ or below
Muscarinic M2     200 テスト C1TT1M2 -80℃ or below
Muscarinic M4     200 テスト C1TT1M4 -80℃ or below
Muscarinic M5     200 テスト C1TT1M5 -80℃ or below
Melanocortin MC4    200 テスト C1TT1MC4 -80℃ or below
Melanocortin MC5    200 テスト C1TT1MC5 -80℃ or below
Opioid Delta      200 テスト C1TT1DOP -80℃ or below
Opioid Kappa     200 テスト C1TT1KOP -80℃ or below
Orexin OX1       200 テスト C1TT1OX1 -80℃ or below
Orexin OX2       200 テスト C1TT1OX2 -80℃ or below
Parathyroid PTHR1    200 テスト C1TT1PTHR1 -80℃ or below
RTK EGFR1    200 テスト C1TT1EGFR1 -80℃ or below
Serotonin 5HT1A    200 テスト C1TT15HT1A -80℃ or below
Serotonin 5HT1B    200 テスト C1TT15HT1B -80℃ or below
Serotonin 5HT4      200 テスト C1TT15HT4 -80℃ or below
Somatostatin SST4    200 テスト C1TT1SST4 -80℃ or below
Tachykinin NK1       200 テスト C1TT1NK1 -80℃ or below
Vasopressin/Oxytocin V2    200 テスト C1TT1V2 -80℃ or below

 テルビウムクリプテートを使用しています。プレートリーダーの機種によっては設定条件の変更をお勧めします。

 

蛍光標識リガンド

レセプター 包装 カタログNo. 保存温度
Adenosine A2A 1バイアル L0058RED -80℃
Adrenoceptor Beta1 1バイアル L0023GRE -80℃
Adrenoceptor Beta2 1バイアル L0011GRE -80℃
Anaphylatoxin C5L2 1バイアル L0042RED -80℃
Angiotensin AT2 1バイアル L0007RED -80℃
Bombesin BB2 1バイアル L0019RED -80℃
Bombesin BB1 1バイアル L0038RED -80℃
Bradykinin B1 1バイアル L0016RED -80℃
Bradykinin B2 1バイアル L0017RED -80℃
Chemokine CCR5 1バイアル L0024RED -80℃
Chemokine CXCR4 1バイアル L0012RED -80℃
Cholecystokinin CCK1  

1バイアル

 

L0013RED

 

-80℃

Cholecystokinin CCK2
Class A Orphans GPR1 1バイアル L0037RED -80℃
Dopamine D1 1バイアル L0031GRE -80℃
Dopamine D2  

1バイアル

 

L0002RED

 

-80℃

Dopamine D3a
Endothelin ETA 1バイアル L0022RED -80℃
Endothelin ETB
Ghrelin GHSR1A 1バイアル L0020RED -80℃
Glucagon GIPR 1バイアル L0018RED -80℃
Glucagon GLP1 1バイアル L0030RED -80℃
Histamine H1 1バイアル L0015GRE -80℃
Histamine H3 1バイアル L0052RED -80℃
Melanocortin MC4 1バイアル L0006RED -80℃
Melanocortin MC5
Muscarinic M1  

1バイアル

 

L0040RED

 

-80℃

Muscarinic M2
Muscarinic M4
Muscarinic M5 1バイアル L0041RED -80℃
Opioid Delta  

1バイアル

 

L0005RED

 

-80℃

Opioid Kappa
Orexin OX1  

1バイアル

 

L0025RED

 

-80℃

Orexin OX2
Parathyroid PTHR1 1バイアル L0033RED -80℃
RTK EGFR1 1バイアル L0053RED -80℃
Serotonin 5HT1A 1バイアル L0029RED -80℃
Serotonin 5HT1B 1バイアル L0045RED -80℃
Serotonin 5HT4 1バイアル L0043RED -80℃
Somatostatin SST4 1バイアル L0064RED -80℃
Tachykinin NK1 1バイアル L0008RED -80℃
Vasopressin/Oxytocin V2 1バイアル L0063RED -80℃

包装は蛍光標識リガンド5,000テスト、標識凍結細胞が約200テストになります。

プラスミド

製品名 包装 カタログNo. 保存温度
pT8-SNAP (Hygromycin) 10 µgr  10 µgr PT8SNAPHYG -80℃
pT8-SNAP (Neomycin) 10 µgr  10 µgr PT8SNAPNEO -80℃
pT8-SNAP (Zeocin) 10 µgr  10 µgr PT8SNAPZEO -80℃
pT8-CLIP (Hygromycin) 10 µgr  10 µgr PT8CLIPHYG -80℃
pT8-CLIP (Neomycin) 10 µgr  10 µgr PT8CLIPNEO -80℃
pT8-CLIP (Zeocin) 10 µgr  10 µgr PT8CLIPZEO -80℃
pT8-HaloTag (Hygromycin) 10 µgr  10 µgr PT8HALOHYG -80℃
pT8-HaloTag (Neomycin) 10 µgr  10 µgr PT8HALONEO -80℃
pT8-HaloTag (Zeocin) 10 µgr  10 µgr PT8HALOZEO -80℃

ドナー標識基質(テルビウム クリプテート)

製品名 包装 カタログNo. 保存温度
SNAP-Lumi4-Tb      2 nmoles SSNPTBC -80℃
SNAP-Lumi4-Tb      5 nmoles SSNPTBD -80℃
SNAP-Lumi4-Tb     5 x 5 nmoles SSNPTBG -80℃
SNAP-Lumi4-Tb     100 nmoles SSNPTBX -80℃
CLIP-Lumi-Tb        20 nmoles SCLPTBE -80℃
CLIP-Lumi-Tb        5 x 20 nmoles SCLPTBF -80℃
CLIP-Lumi-Tb        500 nmoles SCLPTBZ -80℃
HaloTag-Lumi4-Tb    2 nmoles SHALOTBC -80℃

 テルビウムクリプテートを使用しています。プレートリーダーの機種によっては設定条件の変更をお勧めします。

 

アクセプター標識基質(レッド・グリーン)

製品名 包装 カタログNo. 保存温度
SNAP-Red  20 nmoles SSNPREDE -80℃
SNAP-Red  5 x 20 nmoles SSNPREDF -80℃
SNAP-Red  500 nmoles SSNPREDZ -80℃
SNAP-Green  5 nmoles SSNPGRNE -80℃
SNAP-Green  5 x 5 nmoles SSNPGRNF -80℃
SNAP-Green   100 nmoles SSNPGRNZ -80℃
CLIP-Red  20 nmoles SCLPREDE -80℃
CLIP-Red 5 x 20 nmoles SCLPREDF -80℃
CLIP-Red   500 nmoles SCLPREDZ -80℃
CLIP-Green  20 nmoles SCLPGRNE -80℃
CLIP-Green  5 x 20 nmoles SCLPGRNF -80℃
CLIP-Green  500 nmoles SCLPGRNZ -80℃
HaloTag-Red 5 nmoles SHALOREDE -80℃
HaloTag-Green  5 nmoles SHALOGRNE -80℃

赤色蛍光色素は665nmを、また緑色蛍光色素は520nmを測定してください。

Tag-lite® ラベリング バッファー

本バッファーはSNAP-tag発現細胞に蛍光基質を標識する際、また蛍光標識リガンドや細胞を希釈する際に必要です。詳しくは各々の添付文書をご覧ください。

製品名 包装 カタログNo. 保存温度
Tag-liteTM  labeling medium 1バイアル LABMED 2~8℃

GPCRプラスミド

受容体のN末端にSNAP-tagを挿入した各種GPCRプラスミドをご用意しています。
受容体の種類及び価格についてはお問い合わせください。

製品名 包装 カタログNo. 保存温度
pSNAP-5HT1A 5-Hydroxytryptamine 1A 1バイアル PSNAP5HT1A -80℃
pSNAP-5HT1B 5-Hydroxytryptamine 1B 1バイアル PSNAP5HT1B -80℃
pSNAP-5HT2C 5-Hydroxytryptamine 2C 1バイアル PSNAP5HT2C -80℃
pCLIP-5HT2C 5-Hydroxytryptamine 2C 1バイアル PCLIP5HT2C -80℃
pSNAP-Acetylcholine muscarinic receptor M1 1バイアル PSNAPM1 -80℃
pSNAP-Acetylcholine muscarinic receptor M2 1バイアル PSNAPM2 -80℃
pSNAP-Acetylcholine muscarinic receptor M4 1バイアル PSNAPM4 -80℃
pSNAP-Acetylcholine muscarinic receptor M5 1バイアル PSNAPM5 -80℃
pSNAP-Beta2 adrenoreceptor 1バイアル PSNAPBD2 -80℃
pSNAP-Beta1 adrenoreceptor 1バイアル PSNAPBETA1 -80℃
pSNAP-Apelin receptor (AGTRL1) 1バイアル PSNAPAGTRL1 -80℃
pHaloTag-A2A Adenosine receptor 1バイアル PHTA2A -80℃
pSNAP-BB1 Bombesin receptor 1バイアル PSNAPBB1 -80℃
pSNAP-BB2 Bombesin (GRP) receptor 1バイアル PSNAPBB2 -80℃
pSNAP-CCK1 Cholecystokine type A 1バイアル PSNAPCCK1 -80℃
pSNAP-CCK2 Cholecystokine type B 1バイアル PSNAPCCK2 -80℃
pSNAP-CCR5 Chemokine receptor 1バイアル PSNAPCCR5 -80℃
pSNAP-C5L2 Anaphylatoxin receptor 1バイアル PSNAPC5L2 -80℃
pSNAP-CXCR4 Chemokine receptor 1バイアル PSNAPCXCR4 -80℃
pSNAP-D1 Dopamine receptor type 1 1バイアル PSNAPD1 -80℃
pSNAP-D2 Dopamine receptor type 2 1バイアル PSNAPD2 -80℃
pSNAP-D3A Dopamine receptor 1バイアル PSNAPD3A -80℃
pSNAP-Delta opioid receptor 1バイアル PSNAPDOP -80℃
pSNAP-ETA Endothelin receptor type A 1バイアル PSNAPETA -80℃
pSNAP-ETB Endothelin receptor type B 1バイアル PSNAPETB -80℃
pSNAP-Ghrelin receptor type A 1バイアル PSNAPGHSR1A -80℃
pSNAP-GIPR Glucagon receptor 1バイアル PSNAPGIPR -80℃
pSNAP-GLP1 Glucagon receptor 1バイアル PSNAPGLP1 -80℃
pSNAP-GPR1 receptor 1バイアル PSNAPGPR1 -80℃
pSNAP-H1 Histamine receptor 1バイアル PSNAPH1 -80℃
pSNAP-H3 Histamine receptor 1バイアル PSNAPH3 -80℃
pSNAP-HTR4 Serotonin receptor 1バイアル PSNAPHTR4 -80℃
pSNAP-NK1 Tachykinin substance P receptor 1バイアル PSNAPNK1 -80℃
pSNAP-NMU2 Neuromedin U receptor 1バイアル PSNAPNMU2 -80℃
pSNAP-OPRK1 Opioid receptor 1バイアル PSNAPOPRK1 -80℃
pSNAP-OT1 Vasopressin receptor 1バイアル PSNAPOT1 -80℃
pSNAP-OX1 Orexin receptor 1バイアル PSNAPOX1 -80℃
pSNAP-OX2 Orexin receptor 1バイアル PSNAPOX2 -80℃
pSNAP-P2Y1 Purinergic receptor 1バイアル PSNAPP2Y1 -80℃
pSNAP-PTH1 Parathyroid receptor type 1 1バイアル PSNAPPTH1 -80℃
pSNAP-SST4 receptor 1バイアル PSNAPSST4 -80℃
pSNAP-V2 Arginine vasopressin receptor 2 1バイアル PSNAPV2 -80℃
pSNAP-PTHR2 Parathyroid type 2 receptor 1バイアル PSNAPPTHR2 -80℃

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